Apparecchiature per la purificazione degli oligo per la sintesi dei primer oligo,
macchina di supporto per la sintesi degli oligoelementi,
Schede compatibili | 1, 3, 5, 8. |
Filtrazione | filtrazione a soffio, filtrazione ad aspirazione |
Numero di porte di iniezione | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Tipi di piastre compatibili | Piastra C18, piastra a pozzetti profondi, piastra sintetica (compatibile con la maggior parte delle piastre sintetiche), piastra per microtitolazione |
Modulo | asse singolo o doppio asse |
Voltaggio | 220 V |
Garanzia | 1 anno |
Costume | Accettato |
1. Purificazione mediante cromatografia mediante elettroforesi su gel
Utilizzare la cromatografia per elettroforesi su gel di poliacrilammide denaturante per la purificazione.L'agente denaturante è generalmente formammide 4M o urea 7M, la concentrazione di acrilammide è compresa tra il 5 e il 15% e la percentuale di metacrilammide è principalmente compresa tra il 2 e il 10%.
Dopo l'elettroforesi, la posizione della banda dell'acido nucleico deve essere determinata sotto l'irradiazione della luce ultravioletta, il gel contenente l'acido nucleico bersaglio viene tagliato, l'acido nucleico viene frantumato e lisciviato, quindi la soluzione di lisciviazione viene concentrata, dissalata, quantificato e liofilizzato.
2. DMT-On, purificazione HPLC
Scegli la modalità DMT-On durante la sintesi, il prodotto grezzo è stato centrifugato e concentrato a temperatura ambiente per rimuovere l'ammoniaca in eccesso dopo l'aminolisi.
La separazione è stata eseguita utilizzando una colonna C18 con acetonitrile e acido trietilammina-acetico al 10% (TEAA) come eluente.Una volta completata l'eluizione, questa viene concentrata e quindi il gruppo DMT viene rimosso con acido trifluoroacetico.Dopo la neutralizzazione, alcuni sali e piccole molecole vengono rimossi attraverso un tubo intercettatore ed infine dissalati.
Questo metodo permette di ottenere un prodotto con una purezza maggiore, ma è necessario prestare attenzione al verificarsi di fenomeni di depurazione.
3. DMT-Off, purificazione HPLC
Scegliere DMT-Off durante la sintesi e il prodotto grezzo è stato centrifugato e concentrato a temperatura ambiente per rimuovere l'ammoniaca in eccesso dopo l'ammonolisi.
La separazione è stata effettuata utilizzando una colonna C18 con acetonitrile e acido trietilammina-acetico al 10% in acqua come eluente.Dopo che la separazione è stata completata e quantificata, le aliquote vengono liofilizzate.
Questo metodo richiede un'attenta regolazione delle condizioni di separazione e può anche ottenere molecole bersaglio relativamente pure.
L'attrezzatura per la sintesi dell'oligo per il ciclo di sintesi del DNA rna, che si adatta al primer normale e ad altri primer a catena corta, rende l'oligo elevata purezza.
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